EBV，廣泛傳播的人類皰疹病毒
EBV是1964 年在伯基特淋巴瘤（Burkitt lymphoma，BL）中發(fā)現(xiàn)并分離的一種雙鏈 DNA 病毒，在世界各地絕大多數(shù)人都是終身的無癥狀感染者。根據(jù)國際癌癥研究署（IARC）致癌因子的分類標(biāo)準(zhǔn)，EBV位列第一組致癌因子。人類是EBV天然宿主之一，其是傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體，也是一種重要的腫瘤相關(guān)病毒。
EBV 感染影響人體的免疫反應(yīng)，主要感染 B 淋巴細(xì)胞和上皮細(xì)胞，并在淋巴細(xì)胞的致癌轉(zhuǎn)化中起致病作用，與多種淋巴瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切聯(lián)系，如霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma，HL）、彌漫性大 B 細(xì)胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）、原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤、移植后淋巴細(xì)胞增生性疾病（post-transplant lymphoproliferative disorder，PTLD）、胃癌、伯基特淋巴瘤、結(jié)外 NK/T細(xì)胞淋巴瘤等。因此，EB 病毒的存在對許多人類癌癥的確切影響是一個(gè)值得深究的熱點(diǎn)問題。
EBV 通常在其生命周期中建立兩個(gè)階段，潛伏期和裂解復(fù)制期。它主要通過唾液、體液、器官移植和輸血等方式在人群之間進(jìn)行傳播，大約95%的成年人有過感染或處于潛伏感染狀態(tài)。
EBV的感染路徑
1. 急性EBV感染
EBV 主要通過唾液傳播，進(jìn)入人體后先感染口咽黏膜上皮細(xì)胞，當(dāng)上皮細(xì)胞被感染后，EBV會在細(xì)胞內(nèi)組裝產(chǎn)生病毒顆粒，釋放到血液中，感染靜息狀態(tài)下的初始B細(xì)胞（navie B cell）。被感染的B淋巴細(xì)胞會繼續(xù)產(chǎn)生大量的EB病毒顆粒，繼續(xù)進(jìn)入血液循環(huán)，從而導(dǎo)致全身性的感染。
2. 慢性EVB感染
EBV 感染人體后誘發(fā)的機(jī)制可分為兩個(gè)方面。一方面是病毒引起機(jī)體免疫紊亂，活化的 T 淋巴細(xì)胞刺激巨噬細(xì)胞分泌超量的細(xì)胞因子，導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)及淋巴細(xì)胞持續(xù)的異?；罨Ａ硪环矫娌《就ㄟ^潛伏期蛋白激活多條腫瘤信號通路，抑制宿主細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞異常增殖轉(zhuǎn)化，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。
EBV相關(guān)疾病
EBV潛伏感染被認(rèn)為是病毒致腫瘤作用的主要機(jī)制，根據(jù)被感染細(xì)胞表面表達(dá)的抗原不同，潛伏感染分為４型：
●Ⅰ型 潛伏感染主要見于 Butkitt’s淋巴瘤(BL)；
● Ⅱ型 潛伏感染主要見于鼻咽癌、胃癌、霍奇金淋巴瘤(HL)及NK/T細(xì)胞淋巴瘤；
● Ⅲ型 潛伏感染主要見于彌漫性大Ｂ細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)及免疫抑制患者的淋巴組織增生性疾?。?/p>
● Ⅳ型 潛伏感染僅發(fā)生在健康病毒攜帶者的Ｂ淋巴細(xì)胞中。
1. 鼻咽癌
鼻咽癌是發(fā)生在鼻咽腔頂部和側(cè)壁的惡性腫瘤，是目前最為明確的與EBV感染相關(guān)的人類上皮性腫瘤，其發(fā)病率居耳鼻咽喉惡性腫瘤首位，位列中國腫瘤發(fā)病率前10位。在中國，鼻咽癌主要發(fā)生在廣東、廣西、福建等中南部沿海地區(qū)，且男性陽性率高于女性，中年人為主，少數(shù)為年輕人。
鼻咽癌惡性率高，早期可發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。許多患者在出現(xiàn)明顯癥狀后，已經(jīng)處于晚期階段，因此鼻咽癌的早診早治非常重要。
2. 淋巴瘤
EBV相關(guān)淋巴瘤為淋巴細(xì)胞發(fā)生惡變而致的惡性腫瘤，可發(fā)生于 B 淋巴細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞或NK 細(xì)胞，主要包括霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）。
數(shù)據(jù)顯示，大概近二十年來，總體上我國霍奇金淋巴瘤的發(fā)病例數(shù)呈增長趨勢，大部分初治患者可在接受規(guī)范化治療后治愈，但也存在少部分復(fù)發(fā)、難治現(xiàn)象。因此，采用更加有效的檢測方法對患者而言意義重大。
3. 胃癌
胃癌是人體中最常見、最多發(fā)、危害最大的惡性腫瘤之一。研究發(fā)現(xiàn)，EB病毒感染是胃癌的主要病因之一，EB病毒相關(guān)胃癌（Epstein-Barr virus-associated gastric cancer，EBVaGC）約占所有胃癌的1.3%～30.9%。
2014年，美國癌癥基因組圖譜研究計(jì)劃（the Cancer Genome Atlas，TCGA）提出了新的胃癌分子分型，將胃癌腫瘤類型分為 EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）陽性、微衛(wèi)星不穩(wěn)定型、基因組穩(wěn)定型和染色體不穩(wěn)定型。
4. 炎癥性腸病(IBD)
少數(shù)情況下IBD患者的腸活檢組織中可以檢測到較多EBER陽性的淋巴細(xì)胞，特別是在潰瘍性結(jié)腸炎的患者中。此類EBV感染是一種機(jī)會性感染，在IBD病程中的作用還不清楚。
什么是“EBER檢測”？
目前臨床常用的 EB 病毒檢測方法包括:
● 外周血EB 病毒 － DNA 定量檢測；
● 外周血 EB 病毒抗體檢測；
● 免疫組織化學(xué)( immunohistochemistry，IHC) 檢測；
● EB 病毒編碼的小RNA( EB virus encoded small RNA，EBER) 原位雜交( in situ hybridization，ISH) 等方法。
EBER 原位雜交因其敏感性高、特異性強(qiáng)、定位精準(zhǔn)等原因成為活檢組織中診斷EB病毒感染的金標(biāo)準(zhǔn)，可為腫瘤篩查、診斷、治療、及預(yù)后判斷提供可靠的病理學(xué)依據(jù)。
免疫組化法：
EBV潛伏膜蛋白1（LMP-1）被公認(rèn)為病毒基因組編碼的“具有促細(xì)胞癌變和轉(zhuǎn)移作用”的瘤蛋白， LMP-1可通過免疫組化法進(jìn)行檢測，使胞質(zhì)和胞膜著色，客觀表現(xiàn)出被感染細(xì)胞中EB的蛋白表達(dá)情況。然而，免疫組織化學(xué)法僅能檢測病毒蛋白質(zhì)表達(dá)階段，對于細(xì)胞內(nèi)EB低拷貝的檢測靈敏性稍差。
原位雜交法：
EBER原位雜交檢測技術(shù)是公認(rèn)的EB病毒標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。對比免疫組化，原位雜交為核酸水平，免疫組化為蛋白水平，抗原抗體反應(yīng)，雜交更具有特異性。對比非原位方法，EBER原位雜交技術(shù)在檢測EBV時(shí)具有定位作用，能夠確定病毒與組織和細(xì)胞的關(guān)系。
在EBER原位雜交檢測中，使用的是寡核酸探針對已知的EBER1和EBER2兩個(gè)RNA分子進(jìn)行雜交，用地高辛抗體標(biāo)記的核苷酸片段按EBER1和EBER2的特定堿基序列進(jìn)行互補(bǔ)性設(shè)計(jì)，最后再經(jīng)過辣根過氧化物酶-酶底物化學(xué)顯色反應(yīng)來完成，此過程不僅能實(shí)現(xiàn)EBV的檢測，亦可提高診斷靈敏度，實(shí)現(xiàn)定位準(zhǔn)確且特異性強(qiáng)，是公認(rèn)的EB病毒標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。
EBER ISH是判斷器官組織標(biāo)本EBV感染的金標(biāo)準(zhǔn)(by:Reviews in medical virology, 2008, 18(5): 305-319.)
金迪安? EBER原位雜交檢測
由迪安生物推出的EBER探針(原位雜交法)，搭配金迪安?全自動(dòng)免疫組化染色儀DH-4800 Plus，可全自動(dòng)完成高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)，提高科室工作效率，增加科室檢測項(xiàng)目，歡迎垂詢試用。
DH-4800 Plus可一鍵完成烤片、脫片、脫蠟、抗原修復(fù)直至復(fù)染全過程。除常規(guī)的免疫組化實(shí)驗(yàn)，還支持原位雜交、細(xì)胞免疫化學(xué)染色，細(xì)胞雙染以及組織雙染等實(shí)驗(yàn)。標(biāo)準(zhǔn)的流程、精密的加樣、穩(wěn)定的環(huán)境，幫助實(shí)驗(yàn)室獲得高質(zhì)量的染色結(jié)果。
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